БАДАН

ВЫДЕЛЕНИЕ НЕКОТОРЫХ ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ АРБУТИНА ИЗ ЛИСТЬЕВ БАДАНА Л.М. Федосеева, Т. С. Малолеткина Алтайский Государственный медицинский университет, Барнаул

Зеленые листья бадана содержат комплекс фенольных соединений. Целью работы явилось выделение дубильных веществ, флавоноидов и арбутина. В результате разработана схема выделения данных веществ и проведена идентификация арбутина.

Введение.

Несмотря на крупные успехи в области применения синтетических лекарств, препараты природного происхождения приобретают все больший вес в практической медицине. Фармакологически активные вещества растений обладают большей биологической доступностью, как правило, не проявляют побочного действия на организм и менее токсичны. Лекарственные растения содержат комплекс действующих, сопутствующих и балластных веществ. Несмотря на выраженный фармакологический эффект действующих веществ, терапевтические результаты в конечном итоге складываются из воздействий всех веществ [1].

На кафедре фармакогнозии и ботаники АГМУ в течение ряда лет ведутся фитохимические исследования листьев бадана толстолистного. Установлено, что сырье содержит фенольные соединения: фенологликозиды, фенолокислоты, дубильные вещества, флавоноиды и др. [2]. Целью нашей работы является выделение фенольных соединений из листьев бадана и идентификация арбутина.

Экспериментальная часть.

Для проведения исследований использовали зеленые листья бадана толстолистного, собранные в Шеболинском районе Республики Алтай в июле 1997 г.

Выделение индивидуальных веществ из растений складывается из следующих стадий: экстракция, очистка от балластных веществ, выделение суммы биологически активных веществ, выделение индивидуального вещества. Выделение арбутина проводили следующим образом: измельченное сырье заливали водой. Настаивали в течение 30 мин при 100°С, полученное извлечение сливали. Настаивание повторяли 3 раза. В результате экстракции получили вытяжку, содержащую сумму водо-растворимых фенольных соединений и сахаров [3], что подтверждали качественными реакциями на арбутин, дубильные вещества, флавоноиды и сахара [4].

Извлечение упаривали. К полученному концентрату добавляли оксид кальция для осаждения дубильных веществ. Далее к фильтрату добавляли ацетон, который извлекает некоторые флавоноиды [5]. Свободные сахара осаждали в виде озазонов [6]. Дальнейшую очистку извлечения проводили методом колоночной хроматографии. В качестве сорбента использовали оксид алюминия. Из элюата методом кристаллизации выделили белое кристаллическое вещество и провели его идентификацию.

Обсуждение результатов.

В результате проведенных исследований разработана схема выделения арбутина из зеленых листьев бадана.

Выделенное вещество идентифицировали физическими, химическими и физико-химическими методами.
Определение температуры плавления исследуемого вещества проводили по методике ГФ Х1 издания [7]. За температуру плавления принимали среднеарифметическое из 5 параллельных определений, что составило 199.5°С и совпало с температурой плавления стандартного образца. Были проведены цветные реакции на арбутин.

Проведена тонкослойная хроматография на “силуфоле” в системе хлороформ – этиловый эфир (7:3) восходящим методом. После хроматографирования пластинку просматривали в УФ–свете и наблюдали фиолетовую флюоресценцию пятен.

После обработки пятен реактивом Паули они окрасились в желто-оранжевый цвет. В результате определения значений Rf (0.75±0.01) пятен исследуемого и стандартного веществ они совпали.

Спектрофотометрическое определение проводили в диапазоне длин волн от 200 до 360 нм с регистрацией оптической плотности через 2 нм на приборе СФ-46. Полученные спектры поглощения арбутина в стандартном и исследуемом растворах совпали по конфигурации кривой и по положению максимумов поглощения на ней. Максимумы поглощения отмечены при 224 и 284 нм . Параллельно были сняты спектры поглощения арбутина на жидкостном хроматографе “Милихром” в диапазоне длин волн от 200 до 360 нм, регистрацию оптической плотности проводили через 2 нм.

Экстрагирование сырья дистиллированной водой
↓
Получение и упаривание вытяжки
↓
Очистка извлечения
↓
Оксид кальция ацетон фенилгидразин
↓
Осадок суммы Дубильных веществ
Осадок флавоноидов
Осадок сахаров
↓
Отделение осадков
↓
Нанесение очищенного фильтрата на колонку с оксидом алюминия
↓
Элюирование водой
↓
Кристаллизация арбутина

Полученные спектры поглощения полностью совпали со спектрами, снятыми на СФ-46.На основании полученных результатов можно идентифицировать выделенное вещество из листьев бадана как арбутин.

Выводы.

Проведено выделение и разработана схема выделения дубильных веществ, флавоноидов и арбутина из зеленых листьев бадана. Идентификация арбутина проведена на основании физических, химических и физикохимических методов анализа.

Список литературы:

1. Пастушенко Л.В., Лесиовская Е.Е. Фармакотерапия с основами фитотерапии. СПб. 1994. С. 160.
2. Федосеева Л.М., Коваленко С.А, Дитрих О.В. Биологически активные вещества бадана толстолистного, произрастающего на Алтае // Теоретические и практические аспекты изучения лекарственных растений: Мат., посвящ. памяти проф. Л.М. Березнеговской. Томск. 1996. С. 178–180.
3. Муравьев И.А., Коковкин-Щербак Н.И., Федосеева Л.М. Оптимизация процесса экстракции фармакологически активных веществ и разработка технологии сухого экстракта бадана толстолистного. Фармация.1989. Т. 37. №5. С. 25–30.
4. Гринкевич Н.И., Сафронич Л.Н. Химический анализ лекарственных растений. М., 1983. 175 с.5. Запрометов М.Н. Основы биохимии фенольных соединений. М., 1974. 214 с.
6. Малый практикум по органической химии / Под ред. Степаненко Б.Н. М., 1980. 290 с.
7. Государственная фармакопея. Х1 изд. М.,1987. Вып. 2. 340 с.